问答题在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA,以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析,电泳结果如图 15.1(用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照),旁边标出了片段的大小。 如果用克隆在另一个与pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行Southern印迹杂交,预测上述电泳图会出现什么样的杂交带?
问答题
在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA,以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析,电泳结果如图 15.1(用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照),旁边标出了片段的大小。
如果用克隆在另一个与 pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行 Southern 印迹杂交,预测上述电泳图会出现什么样的杂交带?
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关于转位因子,下列正确的是A、是细菌基因组中能改变自身位置的DNA序列B、可从染色体的一个位置转移至另一个位置C、可在染色体与质粒,质粒与质粒之间进行转移D、分为插入序列和转座子两类E、转位因子的转移可引起细菌基因突变或基因转移
科学家选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作用是() A、提高受体细胞在自然环境中的耐热性B、有利于检测目的基因否导入受体细胞C、增加质粒分子的相对分子质量D、便于与外源基因连接
下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的A.限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子S 下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的A.限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子B.载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组DNAC.除质粒外,入噬菌体可作为重组DNA的载体D.筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行E.以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主DNA结合
某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。
有关细菌转位因子的叙述错误的是()A、存在于细菌染色体或质粒上B、可在DNA分子中移动C、不能从一个基因组移动到另一个基因组中D、主要有插入顺序、转座子、转座噬菌体三类E、转位因子的插入可引起基因突变或重组
基因文库是指()。A、人工构建的含有基因组全部DNA片段的DNA克隆所组成的库B、利用限制酶切割的DNA片段库C、利用限制酶切割的基因组DNA的所有片段库D、人工构建的含有全部cDNA片段的克隆库E、利用限制酶切割的全部DNA片段的克隆库
下列关于载体的叙述中,错误的是()A、与目的基因结合后,实质上就是一个重组DNA分子B、对某种限制酶而言,最好只有一个切点,但还要有其他多种限制酶的切点C、目前常用的有质粒、噬菌体和动、植物病毒等D、具有某些标记基因,便于对其进行切割
β珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分,采用具有四环素抗性基因的质粒作为运载体,能使大肠杆菌生产出人的β珠蛋白。下列叙述正确的是()A、可从人的成熟的红细胞中提取DNA,直接分离目的基因B、从造血干细胞提取mRNA反转录形成目的基因C、用CaCl2处理大肠杆菌,有利于重组质粒导入大肠杆菌D、可根据受体细胞是否具有四环素抗性来检测目的基因是否表达
人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是()A、提高受体细胞在自然环境中的耐药性B、有利于对目的基因是否导入进行检测C、增加质粒分子在受体细胞存活的机会D、便于与外源基因连接
单选题限制性内切核酸酶EcoRI在野生型的丸噬菌体DNA中有5个切点、HindⅢ有7个切点,BamHI也有5个切点。调整这些酶切位点的数量,主要通过()。A体内突变B完全酶切后连接C部分酶切D先用甲基化酶修饰后再酶切
单选题将一段外源DNA插入到PBR322的BamHI位点,转化后,阳性重组体的筛选标记是()。A氨苄青毒素抗性(Ampr)和四环素抗性(Tetr)BAmpr,TetsCAmps,TetrDAmps,Tets
问答题某一质粒载体具有Tetr和Kanr的表型,在Kan抗性基因内有一BglI的切点。现用BglI切割该载体进行基因克隆,问:(1)转化后涂皿时应加什么样的抗生素?(2)培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型?(3)如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体?
单选题下列关于质粒pBR322DNA的叙述哪一个是错误的?()A它的分子量较小,易于进入细胞B含有抗四环素(TetR)和抗氨苄青霉素(AmpR)的基因C若用EcoRI切割该质粒,不破坏它的两个抗生素抗性基因D用BamHI限制酶切割pBR322质粒,将破坏它的抗氨苄青霉素基因