大肠杆菌含有2000种以上的蛋白质,为了分离它所表达的一个外源基因的产物并保持它的活性,常有很大困难。但为了某种目的,请根据下列要求写出具体的方法。 ⑴利用溶解度差别进行分离。 ⑵利用蛋白质分子大小进行分离。 ⑶根据不同电荷进行分离。 ⑷以制备有该产物的抗体进行分离。 ⑸产物的浓缩。 ⑹纯度的鉴定。

大肠杆菌含有2000种以上的蛋白质,为了分离它所表达的一个外源基因的产物并保持它的活性,常有很大困难。但为了某种目的,请根据下列要求写出具体的方法。 ⑴利用溶解度差别进行分离。 ⑵利用蛋白质分子大小进行分离。 ⑶根据不同电荷进行分离。 ⑷以制备有该产物的抗体进行分离。 ⑸产物的浓缩。 ⑹纯度的鉴定。


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为了减轻工程菌代谢负荷,提高外源基因表达水平可采取什么措施?

应用转化,转染技术A、基因载体的切割B、外源基因与载体拼接C、重组DNA分子导入受体细胞D、筛选含有重组分子的受体细胞E、表达目的基因编码的蛋白质

不适合在大肠杆菌中表达的外源基因是A.真核cDNAB.真核基因组DNAC.质粒DNAD.M13噬菌体DNA

影响外源基因在大肠杆菌中高效表达的因素有哪些?

克隆质粒载体的基本组成有A.含有可利用宿主细胞复制系统复制起始的区域B.含有一个或多个抗性基因的表达区域C.含有用于外源基因的DNA限制性内切酶作用位点D.含有多克隆位点E.克隆质粒利用自身的复制酶系统,对外源基因进行扩增

某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。

含有-SH基的蛋白质用以下哪种方法分离效果最好?()A、共价色层B、金属螯合色层C、离子交换色层D、疏水色层

简述大肠杆菌作为宿主表达真核蛋白质的特点。

在大肠杆菌中,外源基因表达产物的主要形式为()和()。

提高外源基因在大肠杆菌中表达水平的措施有()。A、调整SD序列与ATG之间的距离B、用点突变的方法改变起始密码子下游的几个密码子C、增加mRNA的稳定性D、使细菌的生长与外源基因的表达分开E、提高表达蛋白的稳定性

外源基因原核表达的优点是()A、具有蛋白质翻译后加工和修饰系统B、不含毒素,安全C、能将外源基因转录的hnRNA剪切加工成成熟的mRNAD、可表达大量的可溶性蛋白质和活性较高的蛋白质E、培养简便、经济、快速,适合大规模生产

影响大肠杆菌系统外源基因表达的因素有哪些?

大肠杆菌系统表达外源基因必须具备的条件有哪些?

与微生物细胞相比较,利用动物细胞表达外源基因具有的缺点是()A、不能生长含糖链的活性物质B、表达的蛋白质的立体结构有错误C、动物细胞培养更复杂D、不能表达原核细胞基

外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是() I融合基因能稳定扩增;II融合蛋白能抗蛋白酶的降解;III表达产物易于亲和层析分离A、IIIB、I+IIC、I+IIID、II+IIIE、I+II+III

外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是()I融合基因能稳定扩增II融合蛋白能抗蛋白酶的降解III表达产物易于亲和层析分离A、IIIB、I+IIC、I+IIID、II+III

大肠杆菌作为外源基因表达系统有哪些优缺点?

产人胰岛素的大肠杆菌()。A、是一种工程菌,属于原核生物B、细胞的基本代谢有别于一般的大肠杆菌C、细胞内没有人胰岛素基因表达产物加工系统D、外源基因在细胞质表达

蛋白质中存在()种氨基酸,除了()外,其余氨基酸的α-碳原子上都有一个自由的()基及一个自由的()基。

单选题外源基因原核表达的优点是()A具有蛋白质翻译后加工和修饰系统B不含毒素,安全C能将外源基因转录的hnRNA剪切加工成成熟的mRNAD可表达大量的可溶性蛋白质和活性较高的蛋白质E培养简便、经济、快速,适合大规模生产

单选题克隆基因的大肠杆菌表达体系(  )。A能表达外源基因的基因组DNAB只能表达外源基因的cDNAC能进行转录后加工D能进行翻译后加工E表达产物一般是可溶性的包涵体

问答题如何实现一个外源基因在体外表达?

问答题简述大肠杆菌作为宿主表达真核蛋白质的特点。

填空题在大肠杆菌中,外源基因表达产物的主要形式为()和()。

多选题麦康凯培养基或伊红美兰培养基能区别出大肠杆菌和沙门杆菌是因为()A培养基中含有葡萄糖B基培养基中含有乳糖C培养基中含有麦芽糖D培养基中含有指示剂E培养中含有甘露糖

多选题提高外源基因在大肠杆菌中表达水平的措施有()。A调整SD序列与ATG之间的距离B用点突变的方法改变起始密码子下游的几个密码子C增加mRNA的稳定性D使细菌的生长与外源基因的表达分开E提高表达蛋白的稳定性

单选题下列哪个指标能证明在大肠杆菌中成功表达了外源酶蛋白质:()A核酸杂交证明蛋白质表达B在蓝白筛选中菌落呈现蓝色CRT-PCR能扩增外源基因D纯化目的蛋自质具有酶活性