核酸分子探针有哪些种类? 试说明各类探针的特点
核酸分子探针有哪些种类? 试说明各类探针的特点
参考答案和解析
(1)基因组DNA探针:克隆化的各种基因片段是最常用的核酸探针,因真核基因组存在高度重复序列,探针应尽可能选用基因的编码序列(外显子),避免使用内含子及其它非编码序列,否则探针可能因高度重复序列的存在引起非特异性杂交而导致假阳性结果。
(2)cDNA探针:与mRNA互补的DNA链称cDNA,cDNA中不存在内含子及其它高度重复序列,故特异性高,是一种较理想的核酸探针。
(3)RNA探针:RNA探针有以下优点:
①RNA:RNA、RNA:DNA杂交体较DNA:DNA杂交体的稳定性高,杂交反应可在更严格的条件下进行,特异性高
②RNA单链不存在双链DNA探针的互补双链的复性,杂交效率高
③RNA无高度重复序列,非特异杂交少
④杂交后可用RNase消化未杂交的RNA探针,可降低杂交本底
(4)寡核苷酸探针:人工合成的寡核苷酸片段作探针优点:
①可以根据需要合成相应的序列,避免基因组DNA探针中高度重复序列所带来的影响
②多数长为15-30bp,即使有一个碱基不配对也会影响杂交链的Tm值,严格控制反应条件,可检测出基因点突变
③探针复杂性降低,杂交反应时间较短。
相关考题:
核酸探针技术是最早运用到临床实践中的分子生物学技术,其原理是选择某一组病原体特异的基因序列,进行克隆、合成,然后用作探针,探针与临床标本中的靶DNA或靶RNA杂交,核酸探针与靶核酸互补序列的结合有高度特异性,可在种或高于或低于种的水平鉴定病原体。影响探针杂交特异性的主要因素是A、温度B、特异性探针C、载体D、标志物E、核酸片段大小常用核酸探针杂交方式中反应速度最快的是A、固相-液相杂交B、原位杂交C、液相-液相杂交D、液相-固相杂交E、荧光原位杂交
以下关于探针的描述,错误的是()。A、核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针B、RNA探针一般都是单链C、分子生物研究中,DNA探针最为常用D、DNA:DNA杂交体比RNA:DNA杂交体具有更高的稳定性E、在PCR反应的过程中加入标记的单核苷酸,扩增的产物即可作为探针
下列关于探针的描述中错误的是()A、实时PCR技术不需要探针B、用于核酸分子杂交C、用于DNA印迹或RNA印迹D、探针序列已知,可通过对探针的检测来判断核酸样品的相关信息E、探针的标记是为了方便后续的检测
核酸探针指由人工标有特定标志物的单链核酸(DNA或RNA)片段,它能以碱基配对互补的方式与具有对应碱基序列的单链核酸结合,用来检测样品中的核酸与探针是否具有同源性,以及同源片段的大小。关于核酸探针,与cDNA探针的特点不相符的是()A、标记方法成熟,有多种标记方法可供选择B、可以克隆到质粒载体中进行无限繁殖,制备方法简便C、适用于基因表达的检测D、相对于RNA而言,cDNA探针不易降解E、不含有基因的内含子序列,用于检测基因表达时杂交效率要明显低于DNA探针
单选题下列关于探针的描述中错误的是()A实时PCR技术不需要探针B用于核酸分子杂交C用于DNA印迹或RNA印迹D探针序列已知,可通过对探针的检测来判断核酸样品的相关信息E探针的标记是为了方便后续的检测
多选题根据性质及来源不同,核酸探针又可被分为()A基因组DNA探针BDNA探针CRNA探针D寡核苷酸探针等