有两种确定核酸中核苷酸序列的方法:化学序列分析法(Maxam-Glbert)和酶学序列分析法(Sanger)。酶学测序法的基本原理/优点是()A、碱基与特殊染料间不同的相互作用B、一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止C、限制性位点与DNA末端标记的相关性D、可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序E、反应是DNA特异的,RNA不会带来干扰。这样既减少纯化步骤,也节约了开支
有两种确定核酸中核苷酸序列的方法:化学序列分析法(Maxam-Glbert)和酶学序列分析法(Sanger)。酶学测序法的基本原理/优点是()
- A、碱基与特殊染料间不同的相互作用
- B、一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止
- C、限制性位点与DNA末端标记的相关性
- D、可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序
- E、反应是DNA特异的,RNA不会带来干扰。这样既减少纯化步骤,也节约了开支
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链末端终止法是目前最通用的DNA测序技术,应掌握其基本原理、主要步骤和体系组成,并熟悉其特点。链末端终止法包括4组独立的酶反应体系,这4组不同的酶反应体系在于分别加入了不同的A、dNTPB、标记的dNTPC、ddNTPD、标记的ddNTPE、dNTP与ddNTP链末端终止法中链的持续延伸与随机但特异发生的链终止反应展开竞争,结果产生一系列酶促产物,终止于互补链上的碱基是A、A,T,C,GB、A,U,C,GC、A,C,GD、A,T,CE、A,U,C对于未知序列测序,链末端终止法的测序引物为A、其亚克隆载体序列的随机引物B、其亚克隆载体序列的定向引物C、其亚克隆载体序列的待测引物D、其亚克隆载体序列的通用引物E、其亚克隆载体序列的双链引物链末端终止法的测序准确性可能受到多种因素影响,其主要原因在于A、该法的测序载体不确定B、该法的测序引物不确定C、该法的DNA聚合酶不确定D、该法的待测模板不确定E、该法测定的序列是酶促反应生成的产物
与Sanger双脱氧末端终止法相比,Maxam-Gilbert化学裂解法最明显的优点是A、不需要加入2',3'-双脱氧核苷三磷酸底物B、不需要DNA聚合酶的参与C、不需要进行同位素标记D、所测序列来自酶促反应的拷贝E、所测序列来自原DNA分子本身
关于PCR的原理,以下论述错误的是()A、DNA的合成是以一股DNA单链为模板B、在引物的存在下,DNA多聚酶沿模板以3’→5’方向延伸引物的过程C、PCR是利用DNA合成的原理,合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物,在体外进行靶DNA的重复合成D、包括三个步骤:①DNA变性②引物与靶DNA退火③引物延伸
链末端终止法是目前最通用的DNA测序技术,应掌握其基本原理、主要步骤和体系组成,并熟悉其特点。链末端终止法的测序准确性可能受到多种因素影响,其主要原因在于()A、该法的测序载体不确定B、该法的测序引物不确定C、该法的DNA聚合酶不确定D、该法的待测模板不确定E、该法测定的序列是酶促反应生成的产物
链末端终止法是目前最通用的DNA测序技术,应掌握其基本原理、主要步骤和体系组成,并熟悉其特点。对于未知序列测序,链末端终止法的测序引物为()A、其亚克隆载体序列的随机引物B、其亚克隆载体序列的定向引物C、其亚克隆载体序列的待测引物D、其亚克隆载体序列的通用引物E、其亚克隆载体序列的双链引物
双脱氧核苷酸常用于DNA测序,其结构与脱氧核苷酸相似,能参与DNA的合成,且遵循碱基互补配对原则。DNA合成时,在DNA聚合酶作用下,若连接上的是双脱氧核苷酸,子链延伸终止;若连接上的是脱氧核苷酸,子链延伸继续。在人工合成体系中,有适量的序列为GTACAT ACATG的单链模板、胸腺嘧啶双脱氧核苷酸和4种脱氧核苷酸。则以该单链为模板合成出的不同长度的子链最多有()A、2种B、3种C、4种D、5种
双脱氧链末端终止法测序反应与普通体外合成DNA反应的主要区别是()。A、DNA聚合酶不同B、dNTP的种类不同C、dNTP的浓度不同D、引物不同E、双脱氧链末端终止法测序反应体系中还需加入ddNTP
单选题链末端终止法是目前最通用的DNA测序技术,应掌握其基本原理、主要步骤和体系组成,并熟悉其特点。对于未知序列测序,链末端终止法的测序引物为()A其亚克隆载体序列的随机引物B其亚克隆载体序列的定向引物C其亚克隆载体序列的待测引物D其亚克隆载体序列的通用引物E其亚克隆载体序列的双链引物
单选题关于PCR的原理,以下论述错误的是()ADNA的合成是以一股DNA单链为模板B在引物的存在下,DNA多聚酶沿模板以3’→5’方向延伸引物的过程CPCR是利用DNA合成的原理,合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物,在体外进行靶DNA的重复合成D包括三个步骤:①DNA变性②引物与靶DNA退火③引物延伸
填空题Sanger法使用特异性引物与___________________模板退火,在DNA聚合酶作用下进行延伸反应,并在_________________作用下进行碱基特异性的链终止,然后采用聚丙烯酰胺凝胶电泳区分长度相差_____________的单链DNA,从而完成的测序反应方法。2’,3’-ddNTP与普通的dNTP不同之处在于_________________。