连接反应
连接反应
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某一质粒载体如图6所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述三种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是____；并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的，其原因是____。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有____的固体培养基。(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自____。
下列哪些因素对保证较高连接效率是有利的（）A、高纯度DNA。B、载体与目的基因摩尔数之比为1：1。C、载体与目的基因摩尔数之比为1：3~5。D、连接反应体系中DNA浓度较高。E、连接反应体系中DNA浓度较低。
DNA复制时，复制叉进行的半保留复制实际上是半不连续复制，（）链上是连续复制，（）链上是不连续合成的，即先合成出小的DNA片段，称为冈畸片段，然后再在酶的催化下将这些小的片段连接成长链。连接反应需要能量，细菌内以（）为能量来源，动物细胞和某些噬菌体以（）为能量来源。
下列有关组合化学的说法不正确的是（）A、组合化学方法可以快速合成数量巨大的化合物B、人们已将计算机辅助设计和组合化学合成相结合来设计先导化合物C、利用组合化学合成技术缩短了药物发现的周期D、组合化学以不同的化合物构件单元为组合，连接反应为特征得到了大量的化学实体E、以上都不正确
单选题下列有关组合化学的说法不正确的是（）A组合化学方法可以快速合成数量巨大的化合物B人们已将计算机辅助设计和组合化学合成相结合来设计先导化合物C利用组合化学合成技术缩短了药物发现的周期D组合化学以不同的化合物构件单元为组合，连接反应为特征得到了大量的化学实体E以上都不正确
单选题关于DNA复制中连接酶的叙述错误的是（）A参与随从链的生成B连接双链中的单链缺口C催化相邻的DNA片段以3′，5′－磷酸二酯键相连D连接反应需要ATP参与E催化相邻的DNA片段以5′，3′－磷酸二酯键相连
填空题平末端连接法（bluntendligation）的连接效率比黏性末端连接的效率低得多，所以通常在连接反应体系中适量添加促进大分子凝聚的凝聚剂，以提高平末端DNA连接的效率。常用的凝聚剂是（）。
填空题DNA复制时，复制叉进行的半保留复制实际上是半不连续复制，（）链上是连续复制，（）链上是不连续合成的，即先合成出小的DNA片段，称为冈畸片段，然后再在酶的催化下将这些小的片段连接成长链。连接反应需要能量，细菌内以（）为能量来源，动物细胞和某些噬菌体以（）为能量来源。