HAT培养基是一种选择性培养基,因其组成中含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)这三种物质而得名。在HAT培养基中,具有次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)的细胞可以正常生长,而缺乏HGPRT的细胞因不能正常繁殖而死亡。已知氨基喋呤可以抑制二氢叶酸还原酶的活性。请你从代谢的角度阐述该培养基设计的原理,并分析两种细胞存亡的原因。
HAT培养基是一种选择性培养基,因其组成中含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)这三种物质而得名。在HAT培养基中,具有次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)的细胞可以正常生长,而缺乏HGPRT的细胞因不能正常繁殖而死亡。已知氨基喋呤可以抑制二氢叶酸还原酶的活性。请你从代谢的角度阐述该培养基设计的原理,并分析两种细胞存亡的原因。
参考答案和解析
HAT是含一定浓度次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一种选择性培养基。DNA合成途径有两种:从头合成和补救途径。免疫脾细胞没有培养特性,不能存活,瘤细胞从头途径被A阻断,自身是HPRT-或(TK-),补救途径被阻断,杂交瘤细胞可以通过融合的脾细胞弥补瘤细胞缺陷,从而在HAT培养基上存活。
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能阻断细胞合成DNA主要途径的叶酸拮抗物是A.次黄嘌呤(H)B.氨基蝶呤(A)C.胸腺嘧啶核苷(T)D.8-氮鸟嘌呤(8-AG)E.磺化乙基甲烷(EMS)通常采用何种毒性药物选育出缺乏次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)的骨髓瘤细胞株A.次黄嘌呤(H)B.氨基蝶呤(A)C.胸腺嘧啶核苷(T)D.8-氮鸟嘌呤(8-AG)E.磺化乙基甲烷(EMS)请帮忙给出每个问题的正确答案和分析,谢谢!
HAT培养基中三种关键成分为 A、次黄嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷B、黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷C、氨基嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷D、腺嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷E、鸟嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷
HAT培养基中三种关键成分为A.次黄嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷B.黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷C.氨基嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷D.腺嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷E.鸟嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷
通常采用何种毒性药物选育出缺乏次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)的骨髓瘤细胞株()A、次黄嘌呤(H)B、B.氨基蝶呤C、胸腺嘧啶核苷(T)D、8-氮鸟嘌呤(8-AG)E、磺化乙基甲烷(EMS)
单克隆抗体是通过杂交瘤技术制备的。杂交瘤细胞是经抗原免疫的B细胞和肿瘤细胞的融合细胞。为便于筛选融合细胞,选用次黄嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷(HGPRT-)的肿瘤细胞和正常B细胞融合后在HAT(次黄嘌呤、氨甲蝶呤、胞苷)选择培养基中培养,此时只有融合细胞才能生长和繁殖。请解释选择原理。
为便于筛选经抗原免疫的B细胞和肿瘤细胞的融合细胞,选用次黄嘌呤–鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷(HGPRT–)的肿瘤细胞和正常B细胞融合后在HAT(次黄嘌呤–氨甲蝶呤–胞苷)选择培养基中培养,此时只有融合细胞才能生长和繁殖,请解释选择原理。
HAT选择性培养基中含的是()A、次黄嘌呤、叠氮钠、氨基蝶呤B、次黄嘌呤、氨基蝶呤、聚乙二醇C、氨基蝶呤、聚乙二醇、叠氮钠D、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷、叠氮钠E、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷、次黄嘌呤
有关杂交瘤技术中,下列说法正确的是()。A、B淋巴细胞要与骨髓瘤细胞融合,目的是使B淋巴细胞能无限分裂B、在培养基中加入氨基喋呤可筛选出杂交细胞C、氨基喋呤可抑制瘤细胞的蛋白质合成D、氨基喋呤能导致B淋巴细胞无限分裂
问答题单克隆抗体是通过杂交瘤技术制备的。杂交瘤细胞是经抗原免疫的B细胞和肿瘤细胞的融合细胞。为便于筛选融合细胞,选用次黄嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷(HGPRT-)的肿瘤细胞和正常B细胞融合后在HAT(次黄嘌呤、氨甲蝶呤、胞苷)选择培养基中培养,此时只有融合细胞才能生长和繁殖。请解释选择原理。
单选题通常采用何种毒性药物选育出缺乏次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)的骨髓瘤细胞株().A次黄嘌呤(H)BB.氨基蝶呤C胸腺嘧啶核苷(T)D8-氮鸟嘌呤(8-AG)E磺化乙基甲烷(EMS)
问答题为便于筛选经抗原免疫的B细胞和肿瘤细胞的融合细胞,选用次黄嘌呤–鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷(HGPRT–)的肿瘤细胞和正常B细胞融合后在HAT(次黄嘌呤–氨甲蝶呤–胞苷)选择培养基中培养,此时只有融合细胞才能生长和繁殖,请解释选择原理。
填空题HAT选择培养基即H为次黄嘌呤、A为()、T为胸腺嘧啶脱氧核苷。