简述Western印迹时使用的抗体种类及特点。
简述Western印迹时使用的抗体种类及特点。
参考答案和解析
抗体质量是影响 Western 印迹成败的关键因素之一。在 Western 印迹过程中蛋白质均发生变性,已经失去了原有蛋白质折叠的空间结构,因此应用于 Western 印迹选择的抗体是识别变性后蛋白质表位的抗体。作用于靶蛋白的第一抗体有单克隆抗体和多克隆抗体两种类型,多克隆抗体往往可以识别同一抗原分子上多个结合位点,因此杂交信号比较强,但也容易产生非特异性条带,使背景增强。单克隆抗体通常只识别一个表位,对抗原分子中某个特定区域的检测有很大优势,特异性强但杂交信号相对弱。第二抗体是针对第一抗体的免疫球蛋白,现多使用非放射性核素标记,包括荧光、碱性磷酸酶、辣根过氧化酶等。
相关考题:
患者,男性,40岁,静脉毒瘾患者。近期发热、肌痛、淋巴结肿大,血常规示单核细胞增多,疑拟HIV感染。初筛试验可用A、PCR检测HIV核酸B、ELISA检测HIV抗体C、ELISA检测HIV抗原D、胶体金免疫技术检测HIV抗体E、免疫印迹法检测病毒抗体确诊采用的试验是A、ELISA检测HIV抗体B、PCR检测HIV的RNAC、Western印迹法检测抗体组分D、Western印迹法检测抗原组分E、病毒分离培养
按照杂交环境的不同,核酸分子杂交可分为固相分子杂交和液相分子杂交两种类型。其中固相分子杂交技术的应用更为普遍。用来鉴定DNA的分子杂交技术是A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、RFLPE、免疫荧光技术用来鉴定RNA的分子杂交技术是A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、RFLPE、免疫荧光技术
男性,40岁,静脉毒瘾患者,近期发热、肌痛、淋巴结肿大,外周血常规检查单核细胞增多,疑为HIV感染。确诊应用的试验是A.ELISA检测HIV抗原B.间接免疫荧光法检测HIV抗原C.Western印迹法检测抗体组分D.Western印迹法检测抗原组分E.重复初筛试验
按照杂交环境的不同,核酸分子杂交可分为固相分子杂交和液相分子杂交两种类型。其中固相分子杂交技术的应用更为普遍。用来鉴定DNA的分子杂交技术是()A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、RFLPE、免疫荧光技术
问答题Southern印迹杂交、Northern印迹杂交及Western免疫印迹彼此之间有哪些不同?