以邻硝基苯-β-吡喃半乳糖苷（ONPG）作为反应系统的底物，经过酶作用后，释放出硝基酚。后者呈黄色，在（）nm处有吸收峰，也可进行比色测定。酶活力（），释放出的硝基酚越多，黄色越深。