问答题有人用限制性内切核酸酶EcoRl分别切割松弛型质粒ColEl和严紧型质粒pSCl01（各有一个切点），然后重组连接形成一个杂种质粒pSCl34，请推测这种质粒有什么特性和用途。
问答题
有人用限制性内切核酸酶 EcoRl 分别切割松弛型质粒 ColEl 和严紧型质粒 pSCl01（各有一个切点），然后重组连接形成一个杂种质粒 pSCl34，请推测这种质粒有什么特性和用途。
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下面关于松弛型质粒(relaxedplasmid)性质的描述中，不正确的是 ( )A、质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数B、在复制过程中，多使用DNA聚合酶IC、可以在氯霉素作用下进行扩增D、通常带有抗药性标记E、同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子
下列有关质粒分子生物学的叙述，错误的是（）A、质粒是共价环状的双链DNA分子B、天然质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列C、质粒在宿主细胞内能独立于染色体DNA自主复制D、松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增E、质粒并非其宿主细胞生长所必需
下列关于载体的叙述中，错误的是（）A、与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子B、对某种限制酶而言，最好只有一个切点，但还要有其他多种限制酶的切点C、目前常用的有质粒、噬菌体和动、植物病毒等D、具有某些标记基因，便于对其进行切割
为了构建重组质粒pZHZ2，可利用限制酶E、F切割目的基因和质粒pZHZ1，然后用相应的酶连接下列叙述中错误的是（）A、基因工程的核心就是构建重组DNA分子B、质粒pZHZ2上存在RNA聚合酶结合的位点C、重组质粒pZHZ2只能被限制酶G、H切开D、质粒pZHZ1、pZHZ2复制时一定会用到DNA聚合酶
单选题下面关于松弛型质粒（relaxedplasmid）性质的描述中，（）是不正确的。A质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数B可以在氯霉素作用下进行扩增C通常带有抗药性标记D同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子
问答题λYES（酵母—大肠杆菌穿梭载体）是构建cDNA文库的高效载体，这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶XhoI（5’-C十TCGAG）进行切割，然后在dTTP存在的情况下，同DNA聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链cDNA同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC和5’—GGTAAATC，它们的5’端都是磷酸。然后将载体和cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用2μg的7载体和0.1μg的cDNA，构建了一个有4×10个克隆的cDNA文库。载体和cDNA分子要经过怎样的处理才能提高产生重组DNA分子的效率？
问答题λYES（酵母—大肠杆菌穿梭载体）是构建cDNA文库的高效载体，这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶XhoI（5’-C十TCGAG）进行切割，然后在dTTP存在的情况下，同DNA聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链cDNA同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC和5’—GGTAAATC，它们的5’端都是磷酸。然后将载体和cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用2μg的7载体和0.1μg的cDNA，构建了一个有4×10个克隆的cDNA文库。能够用XhoI从重组质粒中切出cDNA吗？
填空题质粒的复制像染色体的复制一样，是从特定的起始点开始的。然而，质粒的复制可以是（）向的、或是（）向的。在杂种质粒中，每个复制子斑点都可以有效地加以使用。但是在正常条件下只有一个起点可能居支配地位。并认为：当某些具有低拷贝数的严紧型质粒与松弛性质粒融合后，在正常情况下（）的复制起点可能被关闭。
问答题某一质粒载体具有Tetr和Kanr的表型，在Kan抗性基因内有一BglI的切点。现用BglI切割该载体进行基因克隆，问：（1）转化后涂皿时应加什么样的抗生素？（2）培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型？（3）如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体？
填空题ColEl质粒复制的起始需要三种酶，即（）、（）和（）。