单选题cDNA合成的过程不包括( )。ARNA进行提取、纯化B反转录酶催化dNTP在RNA模板指引下的聚合,生成RNA/DNA杂化双链C用酶或碱除去杂化双链上的RNAD反转录E以DNA单链为模板,Klenow片段催化dNTP聚合
单选题
cDNA合成的过程不包括( )。
A
RNA进行提取、纯化
B
反转录酶催化dNTP在RNA模板指引下的聚合,生成RNA/DNA杂化双链
C
用酶或碱除去杂化双链上的RNA
D
反转录
E
以DNA单链为模板,Klenow片段催化dNTP聚合
参考解析
解析:
cDNA的合成过程:提取总RNA→mRNA的纯化→以mRNA为模板,由反转录酶催化,反转录成cDNA(第一链cDNA合成)→用RNase H切割mRNA-cDNA杂合链中的mRNA序列产生的小片段为引物,以第一链为模板,由DNA聚合酶催化合成第二条cDNA的片段,再通过DNA连接酶的作用连成完整的DNA链(第二链cDNA合成)。
cDNA的合成过程:提取总RNA→mRNA的纯化→以mRNA为模板,由反转录酶催化,反转录成cDNA(第一链cDNA合成)→用RNase H切割mRNA-cDNA杂合链中的mRNA序列产生的小片段为引物,以第一链为模板,由DNA聚合酶催化合成第二条cDNA的片段,再通过DNA连接酶的作用连成完整的DNA链(第二链cDNA合成)。
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